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      FUJIFILM Wako質譜級賴氨酰肽鏈內切酶

      • 型   號:125-05061
      • 價   格:
      • 更新時間:2024-09-11
      • 廠家性質:經銷商

      125-05061,質譜級賴氨酰肽鏈內切酶Lysyl Endopeptidase®產品簡介:
      產品品牌:Wako
      產品名稱:質譜級賴氨酰肽鏈內切酶LysylEndopeptidase®
      產品貨號:125-05061
      FUJIFILM Wako質譜級賴氨酰肽鏈內切酶

      125-05061,質譜級賴氨酰肽鏈內切meiLysyl Endopeptidase®

      125-05061,質譜級賴氨酰肽鏈內切meiLysyl Endopeptidase®產品簡介:

      產品品牌:Wako

      產品名稱:質譜級賴氨酰肽鏈內切meiLysylEndopeptidase®

      產品貨號:125-05061

      產品規格:20 ug×5

      FUJIFILM Wako質譜級賴氨酰肽鏈內切酶

       本產品是質譜分析前處理時常用的蛋白分解mei即賴氨酰肽鏈內切mei,該mei可以特異性切除賴氨suan基團C末端的多肽,可用于蛋白測序分析和 Lys-X 化合物的mei合成。若同時使用賴氨酰肽鏈內切mei和胰mei,可更好地切斷賴氨suan基團的多肽,增加多肽的數量。產品已按照使用習慣做成小包裝,是方便使用的冷凍干燥品。20 μg/支可用于100-200個樣品的凝膠內消化。

      來源:細菌

      外觀:凍干粉(包含2 mmol/L Tris-HCl 緩沖液,pH8)

      活性:0.03~0.07 AU/vial

      分子量:27,000(瓊脂糖過濾),30,000(SDS-PAGE)

      溶解性:溶于水或緩沖液

      穩定性:溶解于 pH 值 5.0-12.0 的 Tris 緩沖液中,可在4℃穩定保存2年;在 pH 值 6.0-11.0、30℃時能穩定保存,但溫度超過50℃時不穩定。

      最適pH值:9.0~9.5

      等電點:6.9~7.0

      底物特異性:

      可水解底物——Tos-Lys-OMeBz-Lys-NH2Bz-Lys-pNA、Lys-pNA

      不可水解底物——Bz-Arg-NH2Bz-Arg-pNAArg-pNA

      抑制劑:DFP、PMSF、TLCK

      特點

      ●  高特異性、高蛋白質消化率、適用于蛋白質譜分析

      ●  提高裂解效率、增加肽段數量

      ●  根據使用量特意制備小包裝,方便使用

      應用

        分別采用胰蛋白mei(Tp)、賴氨酰肽鏈內切mei(Lys-C)和 Tp與Lys-C 聯用進行膠內mei切的效果比較。

        牛血清蛋白 BSA 的條帶(100 ng)通過 SDS-PAGE 獲得,然后分別用 Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 進行mei切,再用 MALDI-TOFMS 法進行分析。

        這些蛋白mei的實驗效果見下表。

      表 1:Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 的結果對照

      這些結果表明 Lys-C mei解的錯誤裂解率*。Tp mei解時加入 Lys-C 后,錯誤裂解率有所降低,同時,可以鑒定出更多的多肽。


      Tp

      Lys-C

      Lys-C+Tp

      裂解位點

      精氨suan和賴氨suan的C端

      賴氨suan的C端

      精氨suan和賴氨suan的C端

      錯誤裂解率

      (錯誤裂解所占比例  )

      多(8%)

      很少(0%)

      少(3%)

      鑒定出的多肽數量

      17

      19

      22

      125-05061.jpg


      胰蛋白mei(Tp)(圖 a)和賴氨酰肽鏈內切mei(Lys-C)+Tp( 圖 b)mei切后的質譜結果對照圖。

      Lys-C+Tp mei切后,可以在 m/z=2000 時得到吸收峰,而單獨的 Tp mei切在 m/z=2000 時沒有吸收峰。該結果表明 Lys-C 可以提高測序覆蓋度。

      ( 數據由大阪醫療中心和婦嬰健康研究所Y. Wada 博士提供 )

      賴氨酰肽鏈內切mei

      賴氨酰肽鏈內切mei,最初由 Masaki 等人從土壤細菌中分離得到。該mei可以特異性剪切賴氨suan殘基C末端和S-氨乙基半胱氨suan殘基的肽鍵,用于蛋白測序和 Lys-X 化合物的mei催化合成。該mei穩定性高,在4M尿素或 0.1% SDS 溶液中 30℃ 孵育6小時之后,仍然擁有完整的生物活性。

      外觀

       凍干粉(包含ca. 10% Tris-HCl buffer,pH 8)

      活性

       見包裝

      分子量

       27,000(凝膠過濾);30,000 (SDS-PAGE)

      溶解性

       易溶于水或緩沖液

      優良pH

       9.0-9.5(酰胺mei的優良活性 pH)

      等電點

       6.9-7.0

      抑制劑

      DFP、PMSF、TLCK

      來源

       細菌

      穩定性

       溶于pH 值 5.0-12.0 的緩沖液中,可于4℃穩定保存。溶于pH 值 6.0-11.0 的緩沖液中,可于30℃穩

       定保存,但是50℃及以上不穩定。

      單位定義

       一單位酰胺meiAU)指在30℃ pH 9.5 時每分鐘產生1 μmol 對硝基苯胺所需的mei量。

      底物特異性

       水解底物:Tos-Lys-OmeBz-Lys-NH2Bz-Lys-pNALys-pNA

       非水解底物:Bz-Arg-NH2Bz-Arg-pNaArg-pNA

      產品編號

      產品名稱

      產品規格

      產品等級

      Wako 125-05061

      Lysyl Endopeptidase®, MS Grade
      賴氨酰肽鏈內切mei,MS級

      20 μg×5

      質譜級

      FUJIFILM Wako質譜級賴氨酰肽鏈內切酶



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